Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CSN8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409800
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CSN8 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CSN8, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CSN8 Anticuerpo (F-8): sc-393482
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CSN8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409800 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
COPS8 codifica CSN8, una subunidad central del signalosoma COP9 que regula la homeostasis proteica al catalizar la desneddilación de las ligasas de ubiquitina cullina-RING. Mediante esta actividad, CSN8 modula la degradación dependiente de ubiquitina de reguladores clave del ciclo celular, factores de transcripción y proteínas de respuesta al estrés, influyendo en procesos como la señalización del daño en el ADN, el equilibrio entre autofagia y proteasoma, y la apoptosis. La función de CSN8 se integra con vías más amplias del sistema ubiquitina–proteasoma y de la neddilación que controlan la transducción de señales y programas del desarrollo. La desregulación de componentes del signalosoma COP9, incluido CSN8, se ha asociado con alteraciones en la señalización proliferativa y en la adaptación celular al estrés, relevantes para la biología del cáncer y fenotipos neurodegenerativos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CSN8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COPS8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COPS8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COPS8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CSN8.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COPS8 para la investigación de la señalización de CSN8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de COPS8 críticos para la función de CSN8
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COPS8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CSN8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CSN8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COPS8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CSN8 (h) y el plásmido HDR CSN8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COPS8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COPS8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.