CRM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400348-KO-2

Descripción general

XPO1 codifica el receptor de exportación nuclear CRM1, una proteína de la familia carioferina-β que reconoce señales de exportación nuclear ricas en leucina y media el transporte dependiente de RanGTP de proteínas y de determinados ARN desde el núcleo hacia el citoplasma. Al controlar el tráfico nucleocitoplasmático, CRM1 regula la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y los programas transcripcionales mediante la localización de cargas como supresores tumorales, factores de transcripción y complejos ribonucleoproteicos. La función de CRM1 se integra con el ciclo de la GTPasa Ran y la dinámica del complejo del poro nuclear para mantener la señalización compartimentalizada y la proteostasis. La actividad desregulada de XPO1/CRM1 y la distribución alterada de sus cargas se estudian con frecuencia en biología del cáncer, respuestas antivirales y mecanismos neurodegenerativos en los que el transporte núcleo–citoplasma está alterado.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CRM1 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen XPO1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del XPO1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de XPO1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CRM1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en XPO1 para la investigación de la señalización de CRM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de XPO1 críticos para la función de CRM1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de XPO1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CRM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CRM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus XPO1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CRM1 (h) y el plásmido HDR CRM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología XPO1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana XPO1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.