Plasmide Double Nickase (h) COX11: sc-405874-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) COX11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide COX11 Double Nickase (h) et le plasmide COX11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant COX11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) COX11 | sc-405874-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) COX11 | sc-405874-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La COX11 humaine code une chaperonne du cuivre conservée, localisée dans la membrane interne mitochondriale, indispensable à la biogenèse de la cytochrome c oxydase (complexe IV). COX11 participe à l’acheminement du cuivre vers le centre CuB de MT-CO1, soutenant la phosphorylation oxydative, le transport d’électrons et une production efficace d’ATP. La perturbation de COX11 altère l’assemblage de la chaîne respiratoire et augmente les réponses au stress mitochondrial, influençant l’homéostasie redox et la reprogrammation métabolique. Les défauts de maturation du complexe IV et le dysfonctionnement mitochondrial associés aux voies liées à COX11 sont pertinents pour l’étude de la neurodégénérescence, des myopathies et de la bioénergétique des cellules cancéreuses.
COX11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus COX11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de COX11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de COX11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de COX11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.