COL11A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406243

Descripción general

COL11A2 codifica la cadena α2 del colágeno tipo XI, un colágeno fibrilar cuantitativamente minoritario pero estructuralmente importante que se integra con el colágeno tipo II para regular el diámetro de las fibrillas de colágeno y la organización de la matriz extracelular, especialmente en el cartílago. Su expresión favorece la diferenciación de los condrocitos, la biomecánica del tejido y el ensamblaje de la matriz durante el desarrollo esquelético, influyendo en procesos como la fibrilogénesis del colágeno y la formación de la matriz pericelular. La alteración de COL11A2 se ha vinculado a displasias esqueléticas hereditarias y a hipoacusia neurosensorial, lo que refleja sus funciones en la integridad del cartílago y en la arquitectura de la matriz extracelular del oído interno. Como gen de matriz, COL11A2 también se utiliza para estudiar la señalización dependiente de la MEC y las interacciones célula–matriz que modulan el fenotipo celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO COL11A2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COL11A2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COL11A2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COL11A2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína COL11A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COL11A2 para la investigación de la señalización de COL11A2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de COL11A2 críticos para la función de COL11A2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COL11A2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido COL11A2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido COL11A2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COL11A2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR COL11A2 (h) y el plásmido HDR COL11A2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COL11A2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COL11A2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.