CHSY3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429749

Descripción general

Chsy3 codifica la condroitín sulfato sintasa 3 (CHSY3), una glicosiltransferasa residente del aparato de Golgi que participa en la elongación de las cadenas de glicosaminoglicanos de condroitín sulfato en los proteoglicanos. Mediante la coordinación con otras polimerasas de condroitín y sulfotransferasas, CHSY3 influye en la organización de la matriz extracelular, el secuestro de factores de crecimiento y la señalización célula–matriz que determinan la morfogénesis y la homeostasis tisular. En sistemas murinos, una composición alterada del condroitín sulfato puede afectar el desarrollo del cartílago y del esqueleto, la plasticidad neural y los microambientes inflamatorios al modular vías dependientes de proteoglicanos. En consecuencia, Chsy3 es relevante para estudios mecanísticos del remodelado de la matriz extracelular y de la biología de los proteoglicanos en modelos de fenotipos musculoesqueléticos y neurobiológicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CHSY3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Chsy3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Chsy3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Chsy3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CHSY3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Chsy3 para la investigación de la señalización de CHSY3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Chsy3 críticos para la función de CHSY3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Chsy3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CHSY3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CHSY3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Chsy3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CHSY3 (m) y el plásmido HDR CHSY3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Chsy3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Chsy3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.