Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
choactase Antibody (E-7): sc-55557. Western blot analysis of choactase expression in SK-N-SH (A), HeLa (B), IMR-32 (C), Jurkat (D), Ramos (E) and HEK293 (F) whole cell lysates.
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choactase双切口酶质粒(h): sc-401333-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- choactase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- choactase双切酶质粒（h）和choactase双切酶质粒（h2）编码针对CHAT的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：choactase: sc-55557，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
choactase双切口酶质粒(h) | sc-401333-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
choactase双切口酶质粒(h2) | sc-401333-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CHAT 基因编码胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase），该酶催化胆碱与乙酰辅酶A（acetyl-CoA）生成乙酰胆碱，从而支持中枢与外周神经系统的胆碱能神经传递。CHAT 活性将细胞乙酰辅酶A代谢与突触小泡装载及受调控的神经递质释放联系起来，影响神经元兴奋性以及神经肌肉信号传导。胆碱能张力的改变与 CHAT 失调已在神经退行性变、认知损害，以及运动神经元和神经肌肉疾病中得到研究；在这些情况下，乙酰胆碱的可用性会塑造神经回路功能与可塑性。作为胆碱能身份的标志物，CHAT 被广泛用于研究分化程序、突触生理以及神经递质通路的调控。
choactase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CHAT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHAT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CHAT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CHAT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。