Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Chk2 (m): sc-424521
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Chk2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Chk2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Chk2 Antibody (A-11): sc-17747
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Chk2 (m) | sc-424521 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Chek2 code la kinase de point de contrôle Chk2, une sérine/thréonine kinase activée en aval d’ATM en réponse aux cassures double brin de l’ADN. Une fois phosphorylée, Chk2 propage la signalisation des dommages à l’ADN en modulant des effecteurs tels que p53 et les phosphatases CDC25, influençant ainsi le contrôle des points de contrôle du cycle cellulaire, le choix des voies de réparation de l’ADN, la sénescence et l’apoptose. Dans les systèmes murins, l’activité de Chek2 est fréquemment étudiée dans des travaux portant sur la stabilité du génome, le stress de réplication et les réponses aux dommages oxydatifs. La dérégulation de la signalisation CHEK2/Chk2 est largement pertinente pour les défauts de réponse aux dommages à l’ADN associés aux cancers et peut modifier la sensibilité au stress génotoxique dans des modèles expérimentaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Chk2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Chek2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Chek2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Chek2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Chk2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Chek2 pour l'étude de la signalisation de Chk2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Chek2 essentiels à la fonction de Chk2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Chek2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Chk2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Chk2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Chek2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Chk2 plasmide HDR (m) et le Chk2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Chek2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Chek2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.