CEP152 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-430248

Übersicht

Cep152 kodiert das zentrosomale Protein CEP152, ein zentrales Gerüstprotein, das für die Zentriolenbiogenese und die Zentrosomenduplikation in Mauszellen erforderlich ist. CEP152 wirkt mit PLK4 und weiteren Faktoren der Zentriolenassemblierung zusammen, um perizentrioläres Material zu rekrutieren und zu organisieren. Dadurch werden die Mikrotubuli-Nukleation und die korrekte Ausbildung eines bipolaren Spindelapparats während der Mitose unterstützt. Eine Störung von CEP152 beeinträchtigt die Zellzyklusprogression, führt zu einer Amplifikation oder einem Verlust von Zentrosomen und begünstigt genomische Instabilität durch fehlerhafte Spindelassemblierung und Chromosomensegregation. Diese Prozesse verknüpfen CEP152 mit Signalwegen, die häufig in der Entwicklungsbiologie, der Neurogenese sowie in krebsrelevanten Mechanismen untersucht werden, insbesondere im Zusammenhang mit mitotischer Genauigkeit und DNA-Schadensantworten.

Das CEP152 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cep152-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cep152-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cep152 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CEP152-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cep152-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CEP152-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Cep152-Exone abzielen, die für die CEP152-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cep152-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CEP152 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CEP152 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cep152-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CEP152 HDR-Plasmid (m) und CEP152 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cep152-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cep152-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.