Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Centaurin α1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407463
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Centaurin α1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Centaurin α1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Centaurin α1 Anticuerpo (G-4): sc-390498
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Centaurin α1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407463 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ADAP1 codifica la centaurina α1, una proteína activadora de GTPasas Arf (Arf GAP) con un dominio de homología con pleckstrina (PH) que conecta la señalización por fosfoinosítidos con el tráfico de membranas y la remodelación del citoesqueleto de actina. Al modular eventos endocíticos y de transporte vesicular dependientes de Arf, la centaurina α1 ayuda a coordinar el reciclaje de receptores y la propagación de señales aguas abajo de los lípidos generados por PI3K. Esta proteína se ha vinculado a la regulación de la migración celular y de la dinámica de adhesión, procesos fundamentales para la organización tisular y la capacidad de respuesta celular. La alteración de la actividad de ADAP1 se ha investigado en contextos en los que el tráfico desregulado y el control del citoesqueleto contribuyen a fenotipos asociados a enfermedad, incluidos el comportamiento invasivo y la señalización aberrante.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Centaurin α1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADAP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADAP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADAP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Centaurin α1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADAP1 para la investigación de la señalización de Centaurin α1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ADAP1 críticos para la función de Centaurin α1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADAP1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Centaurin α1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Centaurin α1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADAP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Centaurin α1 (h) y el plásmido HDR Centaurin α1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADAP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADAP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.