Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CDKAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427224-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDKAL1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CDKAL1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CDKAL1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cdkal1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CDKAL1 Anticorpo (E-9): sc-393447
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDKAL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427224-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Cdkal1** em camundongos codifica a **CDKAL1**, uma metiltiotransferase que modifica o **tRNA^Lys(UUU)** na posição 37 (**ms2t6A37**), contribuindo para a decodificação precisa de códons de lisina durante a tradução. Ao manter a fidelidade translacional, a CDKAL1 influencia a proteostase e as respostas celulares ao estresse, com relevância particular para a função de células secretoras e para a regulação metabólica. Estudos genéticos e funcionais associam a CDKAL1 à homeostase da glicose e ao desempenho das células β pancreáticas, tornando-a um locus frequentemente investigado em vias associadas ao diabetes. Em sistemas murinos, a perturbação de **Cdkal1** é usada para examinar como a modificação de tRNA afeta a síntese proteica, o estresse do retículo endoplasmático (RE) e fenótipos metabólicos subsequentes.
CDKAL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cdkal1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cdkal1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cdkal1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cdkal1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.