Plasmide Double Nickase (h) CDK11: sc-405330-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CDK11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CDK11 Double Nickase (h) et le plasmide CDK11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDK19. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdk11 Antibody (8B6): sc-517026
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CDK11 | sc-405330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CDK11 | sc-405330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le CDK19 humain code une kinase dépendante des cyclines qui fonctionne au sein du module kinase du complexe Mediator afin d’intégrer les signaux de signalisation à la transcription dépendante de l’ARN polymérase II. En phosphorylant des régulateurs transcriptionnels et en influençant la levée de la pause proximale au promoteur, CDK19 contribue au contrôle de programmes d’expression génique liés à la progression du cycle cellulaire, aux réponses au stress et à la différenciation. Une activité ou une expression altérée des CDK associées à Mediator a été reliée à une reprogrammation transcriptionnelle dans le cancer et d’autres troubles prolifératifs, faisant de CDK19 une cible pertinente pour disséquer les réseaux de signalisation oncogéniques et inflammatoires. Les membres de la famille protéique CDK11 sont également impliqués dans la transcription et des processus liés au cycle cellulaire, soulignant l’importance plus générale du contrôle transcriptionnel régulé par les CDK en biologie humaine.
CDK11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDK19 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDK19. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDK19. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDK19.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.