Plasmide Double Nickase (h) CD68: sc-400211-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD68 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD68 Double Nickase (h) et le plasmide CD68 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD68. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD68 Antibody (KP1): sc-20060
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD68 | sc-400211-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD68 | sc-400211-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD68 code une protéine membranaire lysosomale/endosomale fortement glycosylée, très abondante dans les monocytes et les macrophages tissulaires, et largement utilisée comme marqueur de la lignée des phagocytes mononucléés. CD68 participe au trafic vésiculaire et à la maturation phagolysosomale, favorisant la capture et le traitement des lipides, des agents pathogènes et des débris cellulaires. Par ses rôles dans la phagocytose, la gestion des antigènes et la signalisation de l’immunité innée, les cellules myéloïdes CD68-positives modulent les réseaux de cytokines inflammatoires et les programmes de remodelage tissulaire. Des altérations de l’expression de CD68 et l’accumulation de macrophages sont fréquemment étudiées dans des contextes tels que la biologie des plaques d’athérosclérose, les maladies inflammatoires chroniques, la neuroinflammation et la polarisation des macrophages associés aux tumeurs.
CD68 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD68 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD68. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD68. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD68.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.