CD44 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400209-LAC

Human CD44 kodiert ein weit verbreitet exprimiertes transmembranes Glykoprotein, das als Hauptrezeptor für Hyaluronan und andere Liganden der extrazellulären Matrix dient und Zell‑Zell‑ sowie Zell‑Matrix‑Interaktionen koordiniert. Über isoformspezifische Signalgebung und die Kopplung an das Zytoskelett beeinflusst CD44 Adhäsion, Migration, das Homing von Lymphozyten und epithel‑mesenchymale Dynamiken; dabei integriert es Signale aus der extrazellulären Matrix mit intrazellulären Signalwegen wie Rho‑GTPase‑vermitteltem Remodeling und Crosstalk mit Rezeptor‑Tyrosinkinasen. Die CD44‑Aktivität ist häufig mit Entzündungsreaktionen und Gewebeumbau verknüpft, und veränderte Expressions‑ oder Spleißmuster wurden mit Tumorinvasion, metastaseassoziierten Phänotypen und stammzellähnlichen Eigenschaften von Krebszellen in Verbindung gebracht. Diese Merkmale machen CD44 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung mikroumgebungsabhängiger Signalgebung, des Leukozytentransports und der durch die extrazelluläre Matrix gesteuerten Regulation der Genexpression.

CD44 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD44-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD44 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD44-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD44-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD44-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.