Plásmido Doble Nickase (m) CD36: sc-419545-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)CD36 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CD36 (m) y el plásmido de doble nickasa CD36 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Cd36. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD36 Anticuerpo (SMφ): sc-7309
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) CD36 | sc-419545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) CD36 | sc-419545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino *Cd36* codifica CD36, un receptor “scavenger” multifuncional que se une a ácidos grasos de cadena larga, fosfolípidos oxidados y ligandos asociados a lipoproteínas para regular la captación de lípidos y el tráfico intracelular. La actividad de CD36 se integra con el transporte de ácidos grasos y la señalización metabólica, influyendo en el uso mitocondrial de sustratos y en la dinámica de las gotas lipídicas en tejidos como el adiposo, el músculo, el hígado y compartimentos inmunitarios. En macrófagos y células endoteliales, CD36 participa en la captación de lipoproteínas modificadas y en vías de depuración que moldean las respuestas inflamatorias y el estrés oxidativo. La expresión o función desregulada de *Cd36* se estudia ampliamente en modelos de desequilibrio metabólico, resistencia a la insulina, fenotipos de hígado graso, biología de lesiones ateroscleróticas y detección de nutrientes en el microambiente tumoral.
CD36 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cd36 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cd36. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cd36. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cd36 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.