CD206/Mannose Receptor/MMRCRISPR激活质粒(h): sc-400286-ACT

MRC1 编码 CD206，也称为巨噬细胞甘露糖受体（macrophage mannose receptor，MMR），是一种 I 型跨膜 C 型凝集素，主要表达于巨噬细胞及部分树突状细胞亚群。CD206 可与内源性及微生物配体上的、含甘露糖、岩藻糖和 N-乙酰氨基葡萄糖的糖链结合，从而支持受体介导的内吞作用、吞噬作用以及抗原加工。通过在清除作用、糖链识别和糖蛋白清除中的功能，MRC1 参与先天免疫感知并调控炎症极化程序。CD206 表达的改变常被用作替代性激活巨噬细胞的标志，并与慢性炎症、纤维化及肿瘤生物学中的免疫微环境重塑相关。

CD206/Mannose Receptor/MMR CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MRC1的表达。

CD206/Mannose Receptor/MMR CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的MRC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于MRC1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性CD206/Mannose Receptor/MMR表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的MRC1位点，并能够研究内源性位点上依赖于CD206/Mannose Receptor/MMR的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MRC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CD206/Mannose Receptor/MMR通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。