Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCZ1 (h): sc-417084
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CCZ1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CCZ1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CCZ1 Antibody (B-7): sc-514290
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CCZ1 (h) | sc-417084 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CCZ1B code la protéine CCZ1, un composant central du complexe facteur d’échange de nucléotides guanyliques (GEF) CCZ1–MON1, qui active RAB7 afin de coordonner la maturation des endosomes tardifs et la fusion endosome–lysosome. En régulant le trafic membranaire dépendant de RAB7, CCZ1 favorise l’acheminement vers les lysosomes et la dégradation des récepteurs et cargaisons internalisés, influençant le flux autophagie–lysosome et la protéostasie cellulaire. La perturbation de cette voie peut désorganiser l’homéostasie des organites, modifier la diminution des récepteurs de signalisation et affecter les réponses au stress métabolique et protéotoxique. En conséquence, CCZ1B suscite l’intérêt dans les études sur la neurodégénérescence, l’adaptation des cellules cancéreuses et la fonction des cellules immunitaires, où le trafic endolysosomal et l’autophagie sont souvent remodelés.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CCZ1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CCZ1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CCZ1B, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CCZ1B à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CCZ1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CCZ1B pour l'étude de la signalisation de CCZ1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CCZ1B essentiels à la fonction de CCZ1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CCZ1B pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CCZ1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CCZ1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CCZ1B. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CCZ1 plasmide HDR (h) et le CCZ1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CCZ1B pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CCZ1B définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.