Plasmide Double Nickase (h) CBX8: sc-407903-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CBX8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CBX8 Double Nickase (h) et le plasmide CBX8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CBX8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CBX8 Antibody (C-3): sc-374332
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CBX8 | sc-407903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CBX8 | sc-407903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX8 (chromobox 8) est une protéine du groupe Polycomb qui agit comme lecteur de la chromatine au sein du complexe répressif Polycomb 1 (PRC1) canonique, en reconnaissant des marques répressives des histones et en contribuant au maintien de programmes de silençage transcriptionnel. Par la compaction de la chromatine médiée par PRC1 et la régulation de l’ubiquitination des histones, CBX8 participe au contrôle stable de gènes du développement, de l’identité cellulaire et d’états transcriptionnels liés au cycle cellulaire. Une activité dérégulée de CBX8 a été associée à des paysages épigénétiques altérés, qui influencent la prolifération, la différenciation et des voies liées à la sénescence dans de multiples contextes pathologiques. Son rôle dans la répression transcriptionnelle fait de CBX8 une cible utile pour étudier comment la régulation de la chromatine dépendante des Polycomb façonne les réseaux de gènes.
CBX8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CBX8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CBX8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CBX8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CBX8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.