CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-400648-KO-2

Übersicht

CNR1 kodiert den Cannabinoid-Rezeptor 1 (CB1), einen überwiegend neuronal exprimierten G‑Protein-gekoppelten Rezeptor, der Endocannabinoid-Signale weiterleitet, um die Neurotransmitterfreisetzung und die synaptische Plastizität zu regulieren. CB1 koppelt vor allem an Gi/o-Proteine, um die Adenylylcyclase zu hemmen, die cAMP/PKA-Signalübertragung zu modulieren und MAPK/ERK-Signalwege zu aktivieren, wobei er zugleich die Aktivität von Ionenkanälen und die präsynaptische Kalziumdynamik beeinflusst. Über diese Mechanismen trägt CB1 zur schaltkreisweiten Kontrolle von Belohnung, Nozizeption, Appetit, Stressreaktivität und Neuroinflammation bei. Eine dysregulierte CNR1-Signalgebung wurde mit neuropsychiatrischen Phänotypen und metabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht, was CNR1 als molekularen Knotenpunkt für die Untersuchung der Gehirn‑Körper‑Signalübertragung und der homöostatischen Kontrolle unterstützt.

Das CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CNR1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CNR1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CNR1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CNR1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CNR1-Exone abzielen, die für die CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CNR1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CNR1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 HDR-Plasmid (h) und CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CNR1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CNR1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.