cathepsin Z Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403244

Descripción general

CTSZ codifica la catepsina Z (catepsina X), una proteasa lisosomal de cisteína que participa en el recambio intracelular de proteínas y en el procesamiento de péptidos dentro del sistema endolisosomal. La catepsina Z puede modular la adhesión y la migración celulares mediante interacciones que implican su motivo RGD y al configurar redes de proteasas que remodelan el entorno extracelular. Su actividad se ha vinculado al procesamiento de antígenos y a la señalización inflamatoria en células inmunitarias, conectando a CTSZ con vías que gobiernan las respuestas inmunitarias innata y adaptativa. La expresión o actividad desregulada de CTSZ se ha asociado con fenotipos de invasión tumoral y con contextos de neuroinflamación o neurodegeneración, lo que la convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de la proteostasis y de los microambientes inmunitarios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO cathepsin Z (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CTSZ en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CTSZ junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CTSZ tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína cathepsin Z.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CTSZ para la investigación de la señalización de cathepsin Z, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CTSZ críticos para la función de cathepsin Z
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CTSZ para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido cathepsin Z CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido cathepsin Z CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CTSZ. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR cathepsin Z (h) y el plásmido HDR cathepsin Z (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CTSZ para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CTSZ definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.