Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
cathepsin D Antibody (E-7): sc-13148. Near-Infrared western blot analysis of cathepsin D expression in A-431 (A) and U-937 (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgG1 BP-CFL 790: sc-533666.
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cathepsin D双切口酶质粒(h): sc-400207-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cathepsin D 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- cathepsin D双切酶质粒（h）和cathepsin D双切酶质粒（h2）编码针对CTSD的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cathepsin D: sc-377299，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cathepsin D双切口酶质粒(h) | sc-400207-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cathepsin D双切口酶质粒(h2) | sc-400207-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTSD 编码组织蛋白酶 D（cathepsin D），这是一种溶酶体天冬氨酸型内肽酶，负责对经内吞与自噬途径进入的底物进行整体性与选择性的蛋白水解，从而维持溶酶体稳态并支持细胞营养物质循环利用。组织蛋白酶 D 参与内体-溶酶体成熟、抗原加工，以及细胞外基质成分摄取后的降解周转，将 CTSD 活性与蛋白稳态、自噬-溶酶体功能及应激反应联系起来。CTSD 的表达或转运失调与溶酶体完整性改变、神经退行性过程以及肿瘤相关微环境重塑有关，因此在研究细胞存活与炎症信号传导时具有重要意义。因此，人源 CTSD 常被用作模型基因，用于在培养细胞中解析依赖溶酶体的通路以及由蛋白酶驱动的表型。
cathepsin D 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CTSD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CTSD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CTSD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。