Plasmide Double Nickase (h) CASZ1: sc-404756-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CASZ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CASZ1 Double Nickase (h) et le plasmide CASZ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CASZ1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CASZ1 Antibody (B-11): sc-398303
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CASZ1 | sc-404756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CASZ1 | sc-404756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASZ1 (castor zinc finger 1) code un facteur de transcription nucléaire à doigts de zinc qui régule des programmes d’expression génique du développement contrôlant les décisions de destinée cellulaire, la différenciation et l’organisation des tissus. Dans les cellules humaines, CASZ1 influence des réseaux transcriptionnels liés aux processus cardiaques et neurodéveloppementaux et peut moduler des voies gouvernant la prolifération et l’engagement de lignée. Une expression altérée de CASZ1 ou des perturbations génomiques ont été associées à la biologie du neuroblastome et à d’autres contextes où le contrôle transcriptionnel de la croissance et de la différenciation est perturbé. En tant que régulateur se liant à l’ADN, CASZ1 constitue un nœud d’étude pertinent pour comprendre comment la logique cis‑régulatrice et le dosage des facteurs de transcription façonnent des phénotypes normaux et liés à la maladie.
CASZ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CASZ1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CASZ1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CASZ1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CASZ1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.