Plásmido Doble Nickase (h) casein kinase IIα′: sc-401148-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)casein kinase IIα′ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa casein kinase IIα′ (h) y el plásmido de doble nickasa casein kinase IIα′ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CSNK2A2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) casein kinase IIα′ | sc-401148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) casein kinase IIα′ | sc-401148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK2A2 codifica la subunidad catalítica alfa′ de la caseína quinasa II, una quinasa de serina/treonina constitutivamente activa que se asocia con subunidades reguladoras beta para formar el holoenzima CK2. CK2 fosforila un amplio conjunto de sustratos implicados en la progresión del ciclo celular, la señalización de daño en el ADN, la regulación de la cromatina y la biogénesis de ribosomas, y se integra con vías como Wnt/β-catenina, NF-κB y PI3K/AKT para modular la proliferación y las respuestas al estrés. A través de estas funciones, CSNK2A2 contribuye al mantenimiento de la proteostasis y de programas transcripcionales que con frecuencia están desregulados en el cáncer y en otros trastornos caracterizados por redes de fosforilación alteradas. La perturbación de la actividad de CK2 también se utiliza para estudiar el control dependiente de quinasas de la apoptosis, la diferenciación y la señalización inflamatoria en diversos modelos celulares humanos.
casein kinase IIα′ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CSNK2A2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CSNK2A2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CSNK2A2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CSNK2A2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.