Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CAMK2A/CaMKII alpha Double Nickase Plasmid (h): sc-400228-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CAMK2A/CaMKII alpha Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CAMK2A/CaMKII alpha Double-Nickase-Plasmid (h) und CAMK2A/CaMKII alpha Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CAMK2A abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CAMK2A/CaMKII alpha: sc-13141
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CAMK2A/CaMKII alpha Double Nickase Plasmid (h) | sc-400228-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAMK2A/CaMKII alpha Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400228-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMK2A kodiert die Alpha-Untereinheit der Ca2+/Calmodulin-abhängigen Proteinkinase II (CaMKIIα), einer Serin/Threonin-Kinase, die intrazelluläre Ca2+-Transienten in Phosphorylierungsereignisse übersetzt, die für synaptische Transmission und aktivitätsabhängige Plastizität entscheidend sind. CaMKIIα unterliegt einer Autophosphorylierung, um die Kinaseaktivität aufrechtzuerhalten, und moduliert die glutamaterge Signalübertragung durch die Phosphorylierung von Ionenkanälen, Rezeptoren und Gerüstproteinen. Dadurch verknüpft sie Ca2+-Signalgebung mit Zytoskelett-Umbau und Programmen der Genexpression. Diese Kinase ist ein zentraler Knotenpunkt in neuronalen Signalwegen, die Lernen und Gedächtnis beeinflussen, und eine veränderte CAMK2A-Aktivität wurde in experimentellen Modellen mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen sowie mit anfallsbezogenen Mechanismen in Verbindung gebracht. Folglich wird CAMK2A häufig als molekulares Werkzeug eingesetzt, um die Regulation exzitatorischer Synapsen, die Dynamik calciumabhängiger Signalgebung und nachgeschaltete Phosphorylierungsnetzwerke in menschlichen neuronalen Systemen zu untersuchen.
CAMK2A/CaMKII alpha Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAMK2A-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAMK2A abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAMK2A-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAMK2A-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.