Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CALML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400954
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CALML3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CALML3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CALML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400954 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CALML3 codifica a calmodulina-like 3, uma proteína ligante de cálcio do tipo EF-hand que atua como sensor de cálcio, modulando a sinalização dependente de calmodulina de maneira dependente do contexto. CALML3 é enriquecida em tecidos epiteliais e tem sido associada à regulação da organização do citoesqueleto, da dinâmica de membranas e de programas de diferenciação, por meio do controle, impulsionado por cálcio, das atividades de quinases e fosfatases. Ao acoplar os fluxos intracelulares de Ca²⁺ a efetores a jusante, CALML3 pode influenciar processos como adesão celular, motilidade e remodelamento relacionado à barreira epitelial. Padrões alterados de expressão de CALML3 têm sido relatados na patobiologia epitelial e em fenótipos associados ao câncer, sustentando seu estudo na reprogramação de vias de sinalização e em transições de estado celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CALML3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CALML3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CALML3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CALML3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CALML3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CALML3 para a investigação da sinalização de CALML3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CALML3 críticos para a função CALML3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CALML3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CALML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CALML3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CALML3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CALML3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CALML3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CALML3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CALML3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.