cadherin-26 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401989

Descripción general

CDH26 codifica la cadherina-26, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio dentro de la superfamilia de las cadherinas, que ayuda a regular la arquitectura epitelial y la organización de las uniones intercelulares. Al influir en la dinámica de adhesión y en las propiedades de barrera del tejido, la cadherina-26 puede modular procesos como la diferenciación epitelial, la señalización dependiente del contacto y la migración celular. Se ha informado de una expresión alterada de CDH26 en contextos inflamatorios de mucosas, lo que respalda su relevancia para el estudio de las interacciones epitelio–inmunitarias y de la fisiopatología asociada a la barrera.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO cadherin-26 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDH26 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDH26 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDH26 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína cadherin-26.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDH26 para la investigación de la señalización de cadherin-26, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CDH26 críticos para la función de cadherin-26
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDH26 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido cadherin-26 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido cadherin-26 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDH26. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR cadherin-26 (h) y el plásmido HDR cadherin-26 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDH26 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDH26 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.