Plasmide Double Nickase (h) C4b: sc-416372-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C4b correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C4b Double Nickase (h) et le plasmide C4b Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C4B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C4b | sc-416372-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C4b | sc-416372-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le composant du complément 4B (C4B) code C4b, une opsonine centrale générée lors de l’activation des voies classique et des lectines du complément. Après clivage, C4b s’attache de façon covalente aux surfaces cibles et participe à la formation de la convertase C3, amplifiant la surveillance immunitaire médiée par le complément, la clairance des complexes immuns et les interactions avec les voies de signalisation inflammatoires. Les variations du nombre de copies et de la séquence du gène C4 sont liées à une activité du complément altérée et ont été associées à une susceptibilité accrue aux troubles auto-immuns et inflammatoires, notamment l’auto-immunité systémique et la dérégulation immunitaire liée aux infections. Par conséquent, C4B est fréquemment étudié dans les voies qui régissent l’immunité humorale, la consommation du complément et l’inflammation tissulaire.
C4b Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C4B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C4B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C4B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C4B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.