C3 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-419391-LAC-2

マウスC3は補体系の中心的ハブである補体成分3をコードし、プロテアーゼによってC3aとC3bに切断されることで、古典経路・レクチン経路・代替経路を介してオプソニン化、免疫細胞の動員、ならびに自然免疫応答の増幅を駆動する。C3の活性化は病原体や免疫複合体の除去を促進し、凝固系や炎症シグナルとのクロストークを調節するとともに、貪食やサイトカイン産生に影響を与えることで組織恒常性の形成にも寄与する。C3活性の破綻は補体介在性炎症や免疫複合体病態と関連し、自己免疫、感染、神経炎症過程のモデルにおいても重要性が示されている。マウス系でC3を遺伝子編集することにより、補体活性化の機序、受容体—リガンド相互作用、そしてin vivoおよび初代免疫細胞アッセイにおける機能的転帰を解明するための研究が可能となる。

C3 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なC3の発現上昇を可能にします。

C3 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、C3転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性C3の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のC3ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。