Plasmide CRISPR/Cas9 KO C1r (h): sc-405842
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- C1r Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique C1r, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C1r Antibody (F-7): sc-514105
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO C1r (h) | sc-405842 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
C1R code pour le composant du complément C1r, une sérine protéase qui s’associe à C1q et C1s pour former le complexe C1 et initier la voie classique du complément. Après activation, C1r s’autoactive et clive C1s, propageant la signalisation de la cascade du complément, qui favorise l’opsonisation, l’élimination des complexes immuns et la production de médiateurs inflammatoires. L’activité de C1r est liée à la régulation de la surveillance immunitaire innée et à l’interconnexion avec les voies de la coagulation et de l’inflammation dans le milieu extracellulaire. Une dérégulation de C1R a été associée à des états d’activation du complément altérés et à des pathologies d’origine immunitaire, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie du complément et des mécanismes de maladies liées à l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO C1r (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène C1R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du C1R, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert C1R à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine C1r.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en C1R pour l'étude de la signalisation de C1r, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de C1R essentiels à la fonction de C1r
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de C1R pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le C1r plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le C1r plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus C1R. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le C1r plasmide HDR (h) et le C1r (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie C1R pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles C1R définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.