Plasmide Double Nickase (h) C1q-A: sc-402156-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C1q-A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C1q-A Double Nickase (h) et le plasmide C1q-A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C1QA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C1q-A Antibody (7H8): sc-58920
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C1q-A | sc-402156-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C1q-A | sc-402156-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1QA code la chaîne A du composant du complément C1q, une molécule de reconnaissance qui initie la voie classique du complément en se liant aux complexes immuns et aux structures du soi altérées. C1q-A contribue à la formation du complexe C1 avec C1r et C1s, soutenant l’activation en aval du complément, l’opsonisation et la modulation de la phagocytose ainsi que de la signalisation inflammatoire. Au-delà de la surveillance immunitaire innée, C1q influence l’élagage synaptique par la microglie, l’élimination des débris apoptotiques et les réponses associées à la matrice extracellulaire. Des altérations de l’expression de C1QA et de la signalisation dépendante de C1q ont été associées à une dysrégulation immunitaire et à des pathologies inflammatoires, notamment la neuroinflammation et des lésions tissulaires liées au complément, ce qui motive des études mécanistiques dans des cellules humaines.
C1q-A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C1QA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C1QA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C1QA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C1QA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.