Plásmido Doble Nickase (h) C14orf118: sc-412571-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)C14orf118 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa C14orf118 (h) y el plásmido de doble nickasa C14orf118 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPATCH2L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) C14orf118 | sc-412571-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) C14orf118 | sc-412571-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPATCH2L (C14orf118) codifica una proteína predicha que contiene un dominio G-patch, implicada en la biología del ARN, en consonancia con funciones en la unión al ARN y la modulación de eventos de procesamiento del ARN. Las proteínas G-patch interactúan con frecuencia con helicasas de ARN y factores asociados al espliceosoma, lo que las vincula al empalme (splicing) del pre-ARNm, a la dinámica de los complejos ribonucleoproteicos y a un control más amplio de la expresión génica. Aunque C14orf118 sigue estando caracterizado de forma incompleta, la alteración de las vías de procesamiento del ARN puede influir en la regulación del ciclo celular, las respuestas al estrés y la proteostasis mediante una remodelación posterior del transcriptoma. Por ello, GPATCH2L resulta de interés para estudios mecanísticos que conecten el metabolismo del ARN con fenotipos relevantes para modelos de cáncer y de enfermedades del neurodesarrollo o neurodegenerativas, en los que el splicing y la homeostasis del ARN suelen estar alterados.
C14orf118 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPATCH2L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPATCH2L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPATCH2L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPATCH2L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.