Plasmide Double Nickase (h) c-Rel: sc-400478-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) c-Rel correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide c-Rel Double Nickase (h) et le plasmide c-Rel Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant REL. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: c-Rel Antibody (B-6): sc-6955
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) c-Rel | sc-400478-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) c-Rel | sc-400478-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
REL code pour c-Rel, un facteur de transcription de la famille NF-κB qui régule des programmes d’expression génique inductibles contrôlant l’activation des lymphocytes, la production de cytokines, la survie cellulaire et la différenciation. c-Rel participe à la signalisation canonique de NF-κB en aval de récepteurs tels que le TCR/BCR, CD40 et les récepteurs de type Toll, coordonnant des réseaux transcriptionnels inflammatoires et immunitaires. Une activité REL dérégulée et une altération du contrôle de la voie NF-κB ont été impliquées dans des dysfonctionnements immunitaires et des états transcriptionnels oncogéniques, en particulier dans les hémopathies malignes. En tant que régulateur se liant à l’ADN, c-Rel est fréquemment étudié pour ses rôles dans l’engagement de la chromatine dépendant du stimulus et dans une production transcriptionnelle spécifique au contexte.
c-Rel Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus REL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de REL. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de REL. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de REL.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.