Plasmide Double Nickase (h) c-Fos: sc-400009-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) c-Fos correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide c-Fos Double Nickase (h) et le plasmide c-Fos Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOS. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: c-Fos Antibody (D-1): sc-8047
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) c-Fos | sc-400009-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) c-Fos | sc-400009-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **FOS** code **c-Fos**, un facteur de transcription à réponse immédiate qui s’hétérodimérise avec des protéines de la famille **JUN** pour former **AP-1** et relie rapidement les stimuli extracellulaires aux programmes d’expression génique. c-Fos est induit en aval des voies de signalisation **MAPK/ERK**, **JNK**, **p38** et des signalisations dépendantes du calcium, et régule des réseaux transcriptionnels contrôlant la prolifération, la différenciation, les réponses au stress, l’apoptose et la motilité cellulaire. Via le contrôle AP-1–dépendant des cytokines, des enzymes de remodelage de la matrice et des régulateurs du cycle cellulaire, **FOS** intègre des signaux inflammatoires et mitogènes dans de nombreux types cellulaires. Une activité **FOS/AP-1** dérégulée est fréquemment utilisée comme lecture moléculaire de l’activation des voies de signalisation et a été associée, dans des contextes pertinents pour la maladie, à une signalisation oncogénique, à une activation immunitaire aberrante et à des modifications de la plasticité neuronale.
c-Fos Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOS. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOS. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOS.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.