c-Abl CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-418935

Übersicht

Das Mausgen *Abl1* kodiert die Nicht-Rezeptor-Tyrosinkinase c-Abl, ein multifunktionales Signalprotein, das Signale von Wachstumsfaktor-Rezeptoren, Integrinen und genotoxischem Stress integriert, um Proliferation, Zytoskelett-Remodelling, Adhäsion und Apoptose zu regulieren. Die c-Abl-Aktivität beeinflusst Signalwege, die die Aktindynamik und den Umsatz fokaler Adhäsionen steuern, und ist über phosphorylierungsabhängige Proteininteraktionen im Zellkern an der Signalweiterleitung der DNA-Schadensantwort beteiligt. Fehlregulierte *Abl1*-Signalgebung und eine veränderte c-Abl-Kinaseaktivität sind breit relevant für onkogene Transformation und abweichende Programme des Zellüberlebens, was *Abl1* zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung kinasegetriebener Signalnetzwerke macht. In Mausmodellen ermöglicht eine Störung von *Abl1* mechanistische Untersuchungen zu Entwicklung, Immunzellfunktion und Stressantwort-Phänotypen, die mit Tyrosinkinase-Signalgebung verknüpft sind.

Das c-Abl CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Abl1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Abl1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Abl1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die c-Abl-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Abl1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der c-Abl-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Abl1-Exone abzielen, die für die c-Abl-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Abl1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom c-Abl CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom c-Abl CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Abl1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das c-Abl HDR-Plasmid (m) und c-Abl HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Abl1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Abl1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.