BTG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405339

Descripción general

BTG1 (gen de translocación de células B 1) codifica un regulador antiproliferativo que modula la progresión del ciclo celular y la quiescencia celular, con funciones destacadas en la diferenciación hematopoyética y la homeostasis linfoide. La proteína BTG1 actúa como correulador transcripcional e interactúa con la maquinaria de deadenilación del ARNm (complejo CCR4–NOT) mediante interacciones con factores como CAF1/CNOT7, modulando la estabilidad de los transcritos y los programas de expresión génica. A través de estas actividades, BTG1 influye en salidas de señalización vinculadas a respuestas al estrés y puntos de control del desarrollo, incluidas vías que regulan la proliferación, la apoptosis y la diferenciación. La expresión alterada de BTG1 o las lesiones genéticas se asocian de forma recurrente con la biología de las neoplasias linfoides y con fenotipos de respuesta al tratamiento, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos de procesos tipo supresor tumoral y de control transcripcional.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BTG1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BTG1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BTG1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BTG1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BTG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BTG1 para la investigación de la señalización de BTG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de BTG1 críticos para la función de BTG1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BTG1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BTG1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BTG1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BTG1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BTG1 (h) y el plásmido HDR BTG1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BTG1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BTG1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.