Brn-3b/BRN3B/POU4F2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400382

개요

POU4F2(Brn-3b/BRN3B)는 POU 도메인 전사인자를 암호화하며, 세포 유형 특이적 유전자 발현 프로그램을 조절합니다. 특히 신경 분화와 감각 뉴런 정체성의 유지에 중요한 역할을 하며, 그중에서도 망막 신경절 세포에서 두드러집니다. BRN3B는 옥타머 유사 DNA 모티프에 결합함으로써 발달, 생존, 스트레스 반응을 제어하는 전사 네트워크를 조율하고, 세포 운명 결정에 영향을 미치는 보다 광범위한 전사 조절 경로들과도 상호작용합니다. POU4F2 활성의 변화는 분화 조절 이상 및 맥락 의존적인 증식·아폽토시스 변화와 연관되어 왔으며, 신경발달 및 신경퇴행 기전 연구뿐 아니라 암에서의 전사 프로그램 재배선(transcriptional rewiring) 연구에서도 의미가 있습니다. 계통(lineage)을 규정하는 인자로서, 뉴런 정체성과 자극 의존적 전사를 탐구하는 모델에서 마커이자 기능적 핵심 노드로 자주 사용됩니다.

Brn-3b/BRN3B/POU4F2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 POU4F2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 POU4F2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 POU4F2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Brn-3b/BRN3B/POU4F2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Brn-3b/BRN3B/POU4F2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 POU4F2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Brn-3b/BRN3B/POU4F2 기능에 중요한 POU4F2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 POU4F2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Brn-3b/BRN3B/POU4F2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Brn-3b/BRN3B/POU4F2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 POU4F2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Brn-3b/BRN3B/POU4F2 HDR 플라스미드 (h) 및 Brn-3b/BRN3B/POU4F2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 POU4F2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 POU4F2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.