Plasmide Double Nickase (h) BRD7: sc-416299-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BRD7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BRD7 Double Nickase (h) et le plasmide BRD7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BRD7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BRD7 Antibody (B-8): sc-376180
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BRD7 | sc-416299-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BRD7 | sc-416299-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRD7 code une protéine lectrice de la chromatine contenant un bromodomaine, qui se lie aux histones acétylées et contribue au contrôle de la transcription via le remodelage des nucléosomes. Elle agit dans le contexte du remodelage de la chromatine PBAF/SWI/SNF et a été associée à la régulation de la progression du cycle cellulaire, des réponses aux dommages de l’ADN et de programmes transcriptionnels liés au stress. BRD7 module également des réseaux de signalisation, notamment des voies associées à p53 et à PI3K/AKT, influençant l’expression de gènes impliqués dans la prolifération et le métabolisme. Une expression dérégulée de BRD7 ou une occupation altérée de la chromatine a été rapportée dans plusieurs types de tumeurs, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude du contrôle épigénétique, de la stabilité du génome et des dépendances transcriptionnelles oncogéniques.
BRD7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BRD7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BRD7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BRD7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BRD7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.