Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BRD2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402584-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BRD2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BRD2 Double-Nickase-Plasmid (h) und BRD2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BRD2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: BRD2: sc-393720
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BRD2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402584-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRD2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402584-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRD2 (bromodomain containing 2) ist ein Mitglied der BET-Familie epigenetischer Reader-Proteine, das über tandemartig angeordnete Bromodomänen an acetylierte Lysinreste an Histonschwänzen bindet und so Transkriptionsprogramme reguliert. Über Wechselwirkungen mit Chromatin sowie Transkriptionskomplexen trägt BRD2 zur RNA-Polymerase-II-abhängigen Genexpression, zur Zellzyklusprogression und zur reizabhängigen Signalübertragung bei, einschließlich entzündlicher und stressassoziierter Signalwege. Die BRD2-abhängige Chromatinbelegung beeinflusst die Aktivität von Enhancern und Promotoren und verknüpft Histonacetylierungszustände mit der koordinierten Kontrolle von Proliferation und Differenzierung. Eine fehlregulierte BET-Signalgebung, einschließlich veränderter BRD2-Aktivität, wurde in experimentellen Systemen mit onkogenen Transkriptionsnetzwerken und der Biologie immunvermittelter Erkrankungen in Verbindung gebracht.
BRD2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BRD2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BRD2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BRD2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BRD2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.