bradykinin B2 R Double Nickase Plasmid (h): sc-401771-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das bradykinin B2 R Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- bradykinin B2 R Double-Nickase-Plasmid (h) und bradykinin B2 R Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BDKRB2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
bradykinin B2 R Double Nickase Plasmid (h) | sc-401771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
bradykinin B2 R Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BDKRB2 kodiert den Bradykinin‑B2‑Rezeptor (Bradykinin B2 R), einen konstitutiv exprimierten G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor, der Antworten auf Kinine wie Bradykinin und Kallidin vermittelt. Nach Ligandenbindung signalisiert er vor allem über Gq/11, aktiviert dadurch die Phospholipase C, mobilisiert intrazelluläres Ca²⁺ und triggert nachgeschaltete PKC‑, MAPK/ERK‑ sowie NO‑assoziierte Signalwege, die die endotheliale Permeabilität, Vasodilatation, den Tonus der glatten Muskulatur und entzündliche Reaktionen regulieren. Die BDKRB2‑Aktivität greift in das Zusammenspiel zwischen Kallikrein‑Kinin‑ und Renin‑Angiotensin‑System ein und beeinflusst so die vaskuläre Homöostase und das Gewebe‑Remodeling. Eine fehlregulierte BDKRB2‑Signalübertragung wurde mit entzündlichen und kardiovaskulären Phänotypen, ödemassoziierten Prozessen, Schmerzsensibilisierung sowie tumorassoziierter Signalgebung im Mikromilieu in Verbindung gebracht und macht den Rezeptor zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zur GPCR‑Biologie und vaskulären Entzündung.
bradykinin B2 R Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BDKRB2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BDKRB2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BDKRB2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BDKRB2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.