BIGM103 Lentiviral Activation Particles (m): sc-426620-LAC

Slc39a8 kodiert den ZIP8-Metallionentransporter, der die zelluläre Aufnahme zweiwertiger Kationen wie Mangan und Zink vermittelt und zur Aufrechterhaltung der intrazellulären Metallhomöostase beiträgt. Durch die Regulation der Manganverfügbarkeit kann ZIP8 die Aktivität Mn-abhängiger Enzyme beeinflussen, einschließlich von Glykosylierungswegen sowie umfassenderer metabolischer und redoxbezogener Prozesse, die zelluläre Stressantworten prägen. Eine veränderte SLC39A8/ZIP8-Funktion wurde in der Literatur mit inflammatorischer Signalgebung, neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen und metabolischen Merkmalen in Verbindung gebracht, was der zentralen Rolle des Mikronährstofftransports in der Gewebephysiologie entspricht. In Mausmodellen ist Slc39a8 daher ein nützlicher Ansatzpunkt, um metallabhängige Regulation von Signalwegen und Genexpressionsprogrammen zu untersuchen, die für krankheitsassoziierte Mechanismen relevant sind.

BIGM103 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Slc39a8-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BIGM103 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Slc39a8-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BIGM103-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Slc39a8-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.