Plasmide Double Nickase (h) beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2: sc-410695-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Double Nickase (h) et le plasmide beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATP1B2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 | sc-410695-NIC | 20 µg | $410.00 |
ATP1B2 code la sous-unité β2 de la Na⁺/K⁺-ATPase, un complexe ATPase de type P situé dans la membrane plasmique qui maintient les gradients intracellulaires de Na⁺ et de K⁺, essentiels au potentiel de membrane, à l’équilibre osmotique et au transport actif secondaire. Au-delà de l’homéostasie ionique, ATP1B2 contribue à la maturation des protéines membranaires et au trafic du complexe de la pompe, et a été impliqué dans les interactions cellule–cellule et des processus liés à l’adhérence, en particulier dans des contextes excitables et associés au tissu nerveux. En façonnant les gradients électrochimiques, ATP1B2 influence des voies de signalisation couplées aux transporteurs dépendants des ions et à des programmes cellulaires liés à l’excitabilité. Une expression ou une régulation altérée des sous-unités de la Na⁺/K⁺-ATPase est associée à des perturbations de la fonction neuronale et a été étudiée dans le cadre des mécanismes des maladies neurologiques et des réponses au stress cellulaire.
beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATP1B2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATP1B2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATP1B2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATP1B2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.