Plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR (h): sc-400660

Présentation

ADRB1 code le récepteur adrénergique humain β1 (β1-AR), un récepteur couplé aux protéines G qui s’associe principalement à Gs pour stimuler l’adénylate cyclase, augmenter l’AMPc et activer des programmes de phosphorylation dépendants de la PKA. La signalisation du β1-AR régule la chronotropie et l’inotropie cardiaques, influence l’homéostasie du calcium et la machinerie contractile, et s’intègre aux voies MAPK/ERK et GRK–β-arrestine, qui modulent la désensibilisation du récepteur et les réponses transcriptionnelles en aval. Outre les cardiomyocytes, l’activité d’ADRB1 module, dans de nombreux tissus, des voies de signalisation métaboliques et de réponse au stress via les catécholamines du système sympathique. Des variations génétiques et fonctionnelles d’ADRB1 ainsi qu’une dérégulation de la signalisation du β1-AR ont été associées à des phénotypes cardiovasculaires et à des réponses modifiées dans des modèles de remodelage cardiaque et de surestimulation adrénergique.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ADRB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ADRB1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ADRB1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ADRB1 pour l'étude de la signalisation de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de ADRB1 essentiels à la fonction de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ADRB1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ADRB1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR plasmide HDR (h) et le beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ADRB1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ADRB1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.