Plasmide Double Nickase (h2) Bcl-9L: sc-415290-NIC-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h2) Bcl-9L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bcl-9L Double Nickase (h2) et le plasmide Bcl-9L Double Nickase (h22) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCL9L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h2) Bcl-9L | sc-415290-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **BCL9L** code **Bcl-9L**, un coactivateur transcriptionnel qui se lie à la **β-caténine** et coopère avec les facteurs **TCF/LEF** afin de renforcer la signalisation **Wnt canonique** et les programmes d’expression génique en aval qui contrôlent la prolifération, la différenciation et l’homéostasie épithéliale. Grâce à ses interactions avec des complexes transcriptionnels nucléaires et des régulateurs associés à la chromatine, Bcl-9L contribue à déterminer, selon le contexte, la sélection des gènes cibles de Wnt et influence des processus tels que la spécification du destin cellulaire, la migration et l’acquisition de propriétés de type cellule souche. La dérégulation de l’activité transcriptionnelle de la β-caténine dépendante de **BCL9L** a été associée à une activation anormale de la voie Wnt observée dans de nombreux cancers et troubles du développement. L’édition génomique de **BCL9L** facilite les études mécanistiques de la transcription Wnt/β-caténine, la cartographie des dépendances d’interactions protéine–protéine et les criblages de génomique fonctionnelle visant à disséquer les interactions entre voies et les réseaux transcriptionnels oncogéniques dans des cellules humaines.
Bcl-9L Le plasmide double nickase (h2) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCL9L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCL9L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCL9L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCL9L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.