BBS2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404725-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BBS2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BBS2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BBS2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BBS2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BBS2 Anticorpo (A-12): sc-365355
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BBS2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404725-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BBS2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404725-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O BBS2 codifica um componente central do BBSome, um complexo multiproteico necessário para a montagem do cílio primário e para o tráfego seletivo de receptores de membrana e proteínas de sinalização para dentro e para fora do cílio. Por meio de seu papel no transporte ciliar, o BBS2 influencia vias-chave dependentes de cílios, incluindo Hedgehog e outras cascatas de sinalização sensorial que coordenam a homeostase celular e o desenvolvimento tecidual. A perda ou disfunção do BBS2 está associada à síndrome de Bardet–Biedl e a fenótipos relacionados de ciliopatias, tornando-o um alvo amplamente utilizado para estudar mecanismos de disfunção ciliar. Em modelos de células humanas, a perturbação de BBS2 permite investigar a localização de receptores, a dinâmica do transporte vesicular e as respostas transcricionais a jusante associadas à sinalização ciliar alterada.
BBS2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BBS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BBS2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BBS2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BBS2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.