Plásmido Doble Nickase (h) BAF170: sc-402023-NIC

SMARCC2 codifica BAF170, una subunidad estructural central del complejo de remodelación de cromatina dependiente de ATP SWI/SNF (BAF), que regula el posicionamiento de los nucleosomas y la organización de la cromatina de orden superior. BAF170 sustenta programas transcripcionales específicos de linaje al coordinar la accesibilidad de potenciadores y promotores, influyendo así en procesos como el desarrollo neural, el control del ciclo celular y la diferenciación. Mediante interacciones con factores de las vías de respuesta al daño del ADN y de regulación transcripcional, SMARCC2 contribuye al mantenimiento de la estabilidad del genoma y del estado epigenético. La alteración de la composición del complejo SWI/SNF o la disrupción del remodelado de cromatina asociado a SMARCC2 se ha vinculado con programas aberrantes de expresión génica observados en múltiples contextos patológicos, incluidos el cáncer y los trastornos del neurodesarrollo.

BAF170 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMARCC2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMARCC2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMARCC2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMARCC2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.