BAALC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405852

Übersicht

BAALC (brain and acute leukemia, cytoplasmic) kodiert ein zytoplasmatisches Protein, das insbesondere in hämatopoetischen und neuroentwicklungsbezogenen Kontexten angereichert ist und an der Regulation des Zustands von Vorläuferzellen beteiligt ist, einschließlich Aspekten von Proliferation und Differenzierung. In myeloischen Zelllinien wird die BAALC-Expression häufig als molekulares Korrelat unreifer Transkriptionsprogramme und veränderter Signalausgänge herangezogen und überschneidet sich mit Signalwegen, die den Zellzyklus, das Überleben und die Linienfestlegung steuern. Dysregulierte BAALC-Spiegel wurden mit akuten Leukämien in Verbindung gebracht; dort wird BAALC als Teil umfassenderer Genexpressionsnetzwerke untersucht, die mit Leukämogenese und Krankheitsheterogenität verknüpft sind. Diese Eigenschaften machen BAALC zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Mechanismen der Stamm-/Vorläuferzell-Erhaltung und aberrante hämatopoetische Signalgebung in humanen Zellmodellen zu analysieren.

Das BAALC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BAALC-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BAALC-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BAALC nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BAALC-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BAALC-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BAALC-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BAALC-Exone abzielen, die für die BAALC-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BAALC-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BAALC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BAALC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BAALC-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BAALC HDR-Plasmid (h) und BAALC HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BAALC-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BAALC-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.