Plasmide Double Nickase (h) AVP Receptor V2: sc-403177-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) AVP Receptor V2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AVP Receptor V2 Double Nickase (h) et le plasmide AVP Receptor V2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AVPR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) AVP Receptor V2 | sc-403177-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) AVP Receptor V2 | sc-403177-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AVPR2 code le récepteur V2 de la vasopressine (récepteur V2 de l’AVP), un récepteur couplé aux protéines G principalement associé à Gs, qui augmente l’AMPc intracellulaire lors de la liaison de la vasopressine arginine. Cette signalisation active des voies dépendantes de la PKA qui régulent le trafic membranaire et les programmes de réabsorption de l’eau, notamment le contrôle de la localisation de l’aquaporine‑2 dans les systèmes épithéliaux. La fonction d’AVPR2 intègre l’osmorégulation endocrinienne aux mécanismes de signalisation par seconds messagers ainsi qu’aux processus de désensibilisation et d’internalisation du récepteur. Une dérégulation ou des variants entraînant une perte de fonction d’AVPR2 sont associés à une réponse altérée à la vasopressine et font l’objet de nombreuses études dans les troubles de l’équilibre hydrique et les défauts de signalisation des RCPG.
AVP Receptor V2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AVPR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AVPR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AVPR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AVPR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.