Plásmido Doble Nickase (h) AVP Receptor V1a: sc-401691-NIC

AVPR1A codifica el receptor humano 1A de vasopresina arginina (receptor de AVP V1a), un receptor acoplado a proteína G que se acopla principalmente a Gq/11 para activar la fosfolipasa Cβ, elevando el Ca²⁺ intracelular y el diacilglicerol para impulsar la señalización de la proteína quinasa C. Este receptor modula la contracción del músculo liso vascular, la función plaquetaria, la glucogenólisis hepática y la señalización neuroendocrina, integrando las respuestas a la vasopresina en tejidos periféricos y en el sistema nervioso central. Las vías dependientes de AVPR1A se interconectan con los programas de MAPK/ERK y de genes de respuesta inmediata, vinculando la activación del receptor con respuestas transcripcionales y celulares dependientes del contexto. La desregulación de la señalización de AVPR1A o la variación genética se ha investigado en fenotipos cardiovasculares y metabólicos, así como en rasgos neuroconductuales, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de vías sensibles a la vasopresina.

AVP Receptor V1a El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AVPR1A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AVPR1A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AVPR1A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AVPR1A alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.