Plásmido Doble Nickase (h) ATP5I: sc-410696-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATP5I consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATP5I (h) y el plásmido de doble nickasa ATP5I (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATP5I. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATP5I | sc-410696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATP5I | sc-410696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP5I codifica una subunidad pequeña e integral de membrana de la ATP sintasa mitocondrial (complejo V) que contribuye al ensamblaje y la estabilidad adecuados del sector F0 y respalda la fosforilación oxidativa. Al permitir un acoplamiento eficiente de la fuerza protón‑motriz con la producción de ATP, ATP5I ayuda a mantener la homeostasis energética celular, el potencial de membrana mitocondrial y el equilibrio redox. La alteración de subunidades de la ATP sintasa puede afectar la función de la cadena de transporte de electrones, aumentar las especies reactivas de oxígeno y modificar vías de señalización metabólica que influyen en la apoptosis y las respuestas al estrés. La bioenergética mitocondrial desregulada que involucra componentes del complejo V se ha implicado en una variedad de trastornos mitocondriales y en fenotipos más amplios asociados a tejidos con alta demanda energética.
ATP5I El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATP5I en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATP5I. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATP5I. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATP5I alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.