Asparagine synthetase慢病毒激活颗粒(h): sc-402240-LAC

ASNS 编码人类天冬酰胺合成酶，这是一种细胞质酶，催化天冬氨酸和谷氨酰胺在 ATP 依赖条件下转化为天冬酰胺和谷氨酸，从而将氮代谢与氨基酸稳态连接起来。ASNS 通过调控细胞内天冬酰胺的可用性，影响蛋白质合成、氧化还原平衡以及对营养受限的适应性反应，并与整合应激反应（integrated stress response）及氨基酸感知通路相关。ASNS 的表达常在代谢应激条件下受到调节，并可塑造细胞对胞外氨基酸的依赖性，因此与代谢重编程和应激耐受研究密切相关。在营养供给限制生长的情境中，ASNS 活性及其调控的改变与神经发育表型以及肿瘤生物学均有关联。

Asparagine synthetase 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ASNS 表达。

Asparagine synthetase 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在ASNS转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Asparagine synthetase表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 ASNS 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。