ASCC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417767

Descripción general

ASCC1 (subunidad 1 del complejo cointegrador de señal activadora 1) es un factor nuclear implicado en la regulación de la transcripción y el mantenimiento del genoma, y funciona dentro del complejo coactivador ASC-1/ASCC, que interactúa con la expresión génica dependiente de la ARN polimerasa II. ASCC1 se ha vinculado con las respuestas celulares al estrés genotóxico y con la coordinación de procesos asociados a la reparación del ADN, favoreciendo la correcta progresión del ciclo celular y la proteostasis en condiciones de estrés. La alteración de la función de ASCC1 se ha asociado con fenotipos de enfermedades neuromusculares, en consonancia con un papel esencial en el mantenimiento de la homeostasis tisular y de los programas de expresión génica en células diferenciadas. Por ello, ASCC1 se estudia en vías que conectan la transcripción, la señalización del daño en el ADN y las redes reguladoras sensibles al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ASCC1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ASCC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ASCC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ASCC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ASCC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ASCC1 para la investigación de la señalización de ASCC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ASCC1 críticos para la función de ASCC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ASCC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ASCC1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ASCC1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ASCC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ASCC1 (h) y el plásmido HDR ASCC1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ASCC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ASCC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.